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  • 徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

    2016-04-11技術資料

    X射線微型計算機斷層掃描(micro-CT)是一種常規應用于非侵入性技術為生物體的內部解剖和形態的調查。作為micro-CT的結果掃描一疊的灰度圖像由一系列在限定的角度時樣品旋轉采取突起產生的。自從幾年基于實驗室的micro-CT成像系統的數量不斷增長使這種技術可用于研究和應用的廣譜。

    類似的如掃描電子顯微鏡等成像技術,micro-CT允許研究生物樣品中幾乎所有的條件(如鮮,干或防腐劑內)。micro-CT是理想的技術為研究骨骼,牙齒和貝殼在3D,但軟組織的分析,顯著影響,根據化合物與低原子序數元素的存在下通過其低的吸收對比度阻礙。為了克服此限制,幾種方法可以應用于包括不同的染色和/或干燥技術以及相相關對比成像。但是,只要有可能樣品應在干燥條件下進行分析,因為它提供一個顯著更高的信噪比相比掃描在液體樣品。?為了干燥細膩的生物樣品,臨界點干燥被校對是最 好的方法相比例如,化學或空氣干燥,因為它保留了結構,同時盡量減少工件,如組織和失真的收縮。

    書蝎子肌肉微型計算機斷層掃描協議

    介紹

    種類:書蝎(Neobisium SP)。

    書蝎與隨后的X射線顯微計算機斷層攝影術(micro-CT)的臨界點干燥來檢測解剖特征,特別考慮到肌肉組織。?
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    步驟

    樣品架:樣品轉移到微多孔樣品鍋中,并置于濾盤和多孔盆保持器的腔室。?
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    固定和脫水

    • 乙醇(70%):過夜

    • 乙醇系列(80%,90%,96%,100%):2×10分鐘。

    • 碘染色(在100%乙醇1%碘溶液):過夜

    • 乙醇(100%):2×10分鐘。

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    CPD300自動程序

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

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    安裝和掃描

    干燥樣品膠合昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(卡爾蔡司X射線顯微公司,普萊森頓,美國)。

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

    圖1:一本書蝎子prosoma的容積重建(外視圖和內視圖以可視化的肌肉)。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士,格賴夫斯瓦爾德,德國大學。?


    昆蟲的腦的微型計算機斷層掃描協議

    介紹

    種類:吹飛(絲光綠愷撒)

    吹的臨界點干燥,隨后的X射線顯微計算機斷層攝影術(micro-CT),飛來檢測神經解剖學特征。?
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    步驟

    樣品支架:將樣品分別放置在節肢動物保持器的腔室。?
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    固定和脫水

    • 布安固定液:隔夜

    • 0.1M磷酸鹽緩沖液(1.8%蔗糖,pH值7.2):3×10分鐘。

    • 乙醇系列(60%,70%,80%,90%,96%,100%):2×10分鐘。

    • 碘染色(在100%乙醇1%碘溶液):過夜

    • 乙醇(100%):2×10分鐘。?
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    CPD300自動程序

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

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    安裝和掃描

    干燥的樣品被粘在昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(卡爾蔡司X射線顯微公司,普萊森頓,美國)。

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

    圖2:容積重建和擊飛的頭部和大腦的虛擬部分。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士,格賴夫斯瓦爾德,德國大學。?


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    昆蟲幼蟲的微型計算機斷層掃描協議

    介紹

    品種:紅血蟲(搖蚊幼蟲)

    蚊幼蟲與隨后的X射線顯微計算機斷層攝影術(micro-CT)的臨界點干燥以重構內解剖結構。?
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    步驟

    樣品架:樣品分別放置在節肢動物持有人的商會。(奧林巴斯顯微鏡)
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    固定和脫水

    • 2.5%戊二醛(于0.1M磷酸鹽緩沖液):過夜

    • 0.1M磷酸鹽緩沖液(1.8%蔗糖,pH值7.2):3×10分鐘。

    • 乙醇系列(60%,70%,80%,90%,96%,100%):2×10分鐘。

    • 碘染色(在100%乙醇1%碘溶液):過夜

    • 乙醇(100%):2×10分鐘。?
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    CPD300自動程序

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

    安裝和掃描

    干燥樣品膠合昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(卡爾蔡司X射線顯微公司,普萊森頓,美國)。

    徠卡顯微鏡干燥生物樣品準備的顯微分析

    圖3:容積重建和紅血蟲呈現出多種器官系統的虛擬部分。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士,格賴夫斯瓦爾德,德國大學。

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